皖仪科技液相色谱对银黄颗粒中绿原酸的含量测定
银黄颗粒,中成药名。为清热剂,具有清热解毒,消炎之功效。主治上呼吸道感染,如急性扁桃体炎、咽炎。方中银花、连翘芳香辟秽,疏风透表,清热解毒;黄芩清泻肺热;丁香叶祛风除湿止头痛。诸药共奏疏风散热,清泻肺火之功。绿原酸是一种有机化合物,化学式为C16H18O9,是金银花的主要抗菌、抗病毒有效药理成分之一,半水合物为针状结晶(水),110℃变为无水化合物,25℃水中溶解度为4%,热水中溶解度更大。易溶于乙醇及丙酮,极微溶于醋酸乙酯。
绿原酸具有较广泛的抗菌作用,但在体内能被蛋白质灭活。与咖啡酸相似,口服或腹腔注射时,可提高大鼠的中枢兴奋性。可增加大鼠及小鼠的小肠蠕动和大鼠子宫的张力。有利胆作用,能增进大鼠的胆汁分泌。对人有致敏作用,吸入含有本品的植物尘埃后,可发生气喘、皮炎等。
1 实验方法
1.1仪器配置
1.2 测试条件
色谱柱:C18 5μm, 4.6×250mm;
柱温:35℃;
检测波长:327nm
流速:1.0 ml/min;
流动相:A:乙腈;B:0.4%磷酸水进样量:20μL
1.3 仪器及试剂、耗材
试剂:标准物质:绿原酸;
甲醇:色谱纯;
磷酸:分析纯;
辅助装置:分析天平;
溶剂抽滤装置;
超声波清洗机;
实验材料:
滤膜:有机相滤膜,水相滤膜0.45μm
1.4 标样制备
绿原酸:使用50%甲醇将绿原酸标准品(100 μg/mL in Methanol)稀释10倍,制成10μg/mL标准溶液。
1.5 样品配制
银黄颗粒:称取银黄颗粒0.5007g置50mL棕色容量瓶中,加50%甲醇40mL,超声处理30min,放冷,加50%甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2 结果与讨论
2.1标准品
图1 绿原酸标准品(10μg/L)色谱图
说明:由图及数据可见,峰型对称,理论塔板数为52573,满足药典要求:理论塔板数按绿原酸计不低于2000。
2.2 样品
图2 银黄颗粒特征谱图(mAU-100—1600)
图3 银黄颗粒特征谱图(mAU-20—200)
说明:由上述银黄颗粒特征谱图可见,样品分离较好,样品分离度在1.5以上。2.3 样品重复性
图4银黄颗粒色谱叠加图(n=3)
说明:由上述银黄颗粒重复性数据可见,样品重复性较好,保留时间RSD值为0.073%,峰面积RSD值为0.187%。
3 结论
本次采用皖仪科技高效液相色谱仪配置紫外-可见光检测器,依据《中国药典》2020版对银黄颗粒中的绿原酸进行含量测定,由上述数据可知,绿原酸理论塔板数为53573,符合药典要求理论塔板数按绿原酸计不低于2000;重复性较好,保留时间RSD值为0.073%,峰面积RSD值为0.187%;本次检测某品牌银黄颗粒中含绿原酸19.363μg/mL。
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